由于大罐实罐灭菌升温和降温过程所需时间要比小罐时间长得多,实际上长时间升温和降温过程也是杀菌过程,所以大罐实罐灭菌所需的温度应比小罐灭菌的温度低,所需的灭菌时间应比小罐短。否则,会导致培养液营养成分的严重破坏,影响发酵正常进行。而小罐由于容积小,升温快,降温也快,实际达到杀菌温度的杀菌时间短,为了保证灭菌完全,所以小罐实罐灭菌的温度应比大罐高,时间应比大罐长。
其次小罐灭菌时,要严格控制罐内料液的体积。这是因为罐小容积小,灭菌过程受到蒸汽冷凝水和排汽大小影响,会使料液体积大起大落,影响定容正确性。因此小罐灭菌在配料定容时更应认真考虑冷凝水因素;同时在灭菌前,应充分排除蒸汽管路内的冷凝水;灭菌时,排汽要适度。